PCR實(shí)驗(yàn)室通常采用非單向流送風(fēng)方式，所謂非單向流，指氣流流線方向不平行，風(fēng)速也不一致。非單向流的氣流組織方式有上送下回式、上送下側(cè)回式、測(cè)送下回式、上送上回式、PCR實(shí)驗(yàn)室一般采用上送下回式。上部送風(fēng)依靠高效送風(fēng)口進(jìn)入房間，下部回風(fēng)依靠每個(gè)房間的對(duì)稱分布的排風(fēng)柱下部的排風(fēng)口排風(fēng)。

　目前PCR應(yīng)用已得到長(zhǎng)足的發(fā)展，已成為疫病診斷，疫情控制等方面的有力工具，為了避免在PCR方法中出現(xiàn)污染及出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果等現(xiàn)象，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境安全控制上嚴(yán)格做到實(shí)驗(yàn)室獨(dú)立區(qū)域設(shè)計(jì)，功能分區(qū)明確，保證實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境，人流物流嚴(yán)格分流，設(shè)計(jì)合理的壓力梯度，形成有序的氣流組織方向，切實(shí)做到避免交叉污染。

　PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction）的簡(jiǎn)稱，是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。

　避免污染是PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)首要考慮重點(diǎn)

　由于PCR技術(shù)的高度敏感性，PCR技術(shù)要求高、影響因素多，從樣品制備到結(jié)果的產(chǎn)生，任何一處細(xì)微的失誤均會(huì)造成結(jié)果的偏差，導(dǎo)致樣品的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果。

　PCR實(shí)驗(yàn)室研究過(guò)程中，很多操作都會(huì)產(chǎn)生氣溶膠，比如離心、混勻等操作閔。為保證環(huán)境安全，PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建設(shè)需獨(dú)立區(qū)域設(shè)計(jì)，避免與其余環(huán)境的交叉混雜，下面SICOLAB根據(jù)我們做過(guò)的工程實(shí)例從平面布局、凈化區(qū)域劃分，人物流設(shè)計(jì)和壓差控制等方面具體介紹。

　一丶PCR實(shí)驗(yàn)室區(qū)域劃分

　1、功能劃分

　試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)、純化區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)、后純化區(qū)（如上布局圖）。

　2、SICOLAB設(shè)計(jì)原則

　按國(guó)家衛(wèi)生部的要求，各實(shí)驗(yàn)區(qū)域必須是相互獨(dú)立的，不能直通，每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋，進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向順序，即只能從左邊試劑準(zhǔn)備區(qū)，標(biāo)本制備區(qū)，擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)，純化區(qū)，擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)到后純化區(qū)，避免發(fā)生交叉污染。

　3、為避免樣本間的交叉污染，房間采取凈化控制，總體設(shè)計(jì)為10萬(wàn)級(jí)。閘間（緩沖間）設(shè)計(jì)為正壓區(qū)，保證與外界環(huán)境隔離，避免從鄰近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)域的氣溶膠污染。

　二、氣流設(shè)計(jì)

　人流物流設(shè)計(jì)各行其道，避免交叉混雜，整個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)一個(gè)公用走廊，工作區(qū)域之間設(shè)計(jì)試劑物品傳遞專用窗，做到人物分流。

　1、物流：在試劑準(zhǔn)備區(qū)與標(biāo)本制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)與PCR擴(kuò)增區(qū)之間，以及擴(kuò)增區(qū)域和純化區(qū)之間設(shè)計(jì)有電子連鎖不銹鋼傳遞窗，以單向進(jìn)行試劑、標(biāo)本等物品傳送，配制的試劑通過(guò)單向傳遞窗由試劑準(zhǔn)備區(qū)傳遞到標(biāo)本制備區(qū)，處理過(guò)的標(biāo)本通過(guò)單向傳遞窗由標(biāo)本制備區(qū)傳遞到PCR擴(kuò)增區(qū)，按照工藝流程逐次傳遞，避免返流。單向物品傳送系統(tǒng)既保障了標(biāo)本試劑不受污染，又保障了標(biāo)本試劑不污染環(huán)境。

　2、人流：人員通過(guò)閘間分別進(jìn)入各自實(shí)驗(yàn)區(qū)域，進(jìn)出各實(shí)驗(yàn)區(qū)域需要在閘間區(qū)域更換潔凈工作服，手消毒等。

　三、壓差設(shè)計(jì)

　PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)計(jì)為負(fù)壓潔凈室，通過(guò)壓差控制，使整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染，并且降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。

　各個(gè)實(shí)驗(yàn)室與非潔凈區(qū)之間的閘間保持正壓，＞10Pa，實(shí)驗(yàn)與閘間之間的氣流組織方向?yàn)椋涸噭?zhǔn)備區(qū)空氣流向閘間，標(biāo)本制備區(qū)流向閘間，而PCR擴(kuò)增區(qū)氣流方向由閘間流向PCR擴(kuò)增區(qū)，純化區(qū)同理；

　同時(shí)按照試劑單向流方向，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室之間設(shè)計(jì)不同壓力梯度來(lái)實(shí)現(xiàn)單向氣流組織方向，由試劑準(zhǔn)備區(qū)（+20Pa）、標(biāo)本制備區(qū)（+15Pa）、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)（-5Pa）、純化區(qū)（-10Pa）、擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)（-20Pa）、到后純化區(qū)（-25Pa）壓力逐漸降低，形成單向負(fù)壓壓力梯度。

　四、其它安全設(shè)施

　PCR實(shí)驗(yàn)室為潔凈空調(diào)系統(tǒng)，系統(tǒng)形式采用直流系統(tǒng)不回風(fēng)，防止交叉污染；試劑準(zhǔn)備間設(shè)計(jì)超凈臺(tái)，保證試劑免受空氣環(huán)境污染；標(biāo)本制備間設(shè)計(jì)生物安全柜，保證標(biāo)本不污染室內(nèi)環(huán)境，并保證標(biāo)本免受環(huán)境污染。